Microscopie par fluorescence à feuillet de lumière

Lightsheet Z.1

Acquisition rapide d'images rapide et en douceur de grands échantillons selon différents angles de vue

Lightsheet Z.1

  • Introduction

    Acquisition d'image à long terme pour échantillons de grande taille avec microscopie à feuillet de lumière

    Imaginez que vous ayez accès à un système d'imagerie qui pourrait délivrer des coupes optiques d'échantillons de grande taille avec quasiment aucune phototoxicité ni bleaching et dans une résolution temporelle élevée.

    C'est exactement ce que réalise Lightsheet Z.1 de ZEISS. Le microscope à fluorescence à feuillet de lumière, une exclusivité ZEISS, vous permet d'enregistrer le développement d'échantillons vivants de grande taille et de procéder à une acquisition d'image en douceur afin d'obtenir un contenu informatif exceptionnellement élevé.

    Il est également rapide : Lightsheet Z.1 est l'outil dont vous avez besoin pour obtenir des coupes optiques à une vitesse inégalée. Capturez des images du volume de votre échantillon complet à une résolution subcellulaire, et ce, en une fraction du temps nécessaire en utilisant d'autres techniques.

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  • Points forts

    Microscopie par fluorescence à feuillet de lumière (LSFM) avec Lightsheet Z.1

    Imagerie Multiview. Offrir une réelle flexibilité.
    • Utilisez l'imagerie Multiview pour trouver la position idéale de votre échantillon par rapport à l'axe de l'optique de détection
    • Capturez des images d'échantillons complets par l'acquisition d'informations complémentaires de différentes vues, avant de les recombiner dans une étape de post-traitement direct.
    • Améliorez la résolution de votre ensemble des données en recombinant les informations provenant de différentes vues et en utilisant une déconvolution dédiée afin d'améliorer encore plus la qualité de l'image.
     
    Le meilleur de tous les mondes. Optique optimisée pour microscopie à feuillet de lumière
    • Façonnez le feuillet de lumière de l'éclairage avec des optiques cylindriques combinées et un mécanisme de balayage de faisceau.
    • Fiez-vous à une optique conçue spécifiquement et à un scanner pivotant pour obtenir une coupe optique avec l’éclairage le plus homogène parmi tous les microscopes LSFM.
    • Protect your sample by using extremely low laser intensities to minimize bleaching.
     
    Imagerie à fluorescence pour les échantillons vivants de grande taille
    • Créez des ensembles de données Multiview en utilisant une nouvelle approche du positionnement de l'échantillon.
    • Réalisez des expériences avec un tissu éclairci par le fluide Scale (Hama et al, Nat Neurosci. 2011), avec un indice de réfraction n=1,38, ou avec un éclaircissement aqueux avec n=1,45 (par ex. FocusClear™ par CelExplorer Labs)
    • Utilisez l'interface de déclenchement optionnelle pour maintenir des conditions physiologiquement pertinentes et profitez de la combinaison améliorée des informations d'image et du contrôle des conditions environnementales.

     

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  • Éclaircissement

    L'éclaircissement des tissus vous permet de capturer des images en profondeur dans des échantillons biologiques de grande taille tels que des coupes de tissus, des cerveaux, des embryons, des organes, des sphéroïdes ou des biopsies. Vous pouvez utiliser la profondeur de pénétration optique améliorée pour capturer les signaux de fluorescence des organes entiers. L'éclaircissement devient ainsi une technique prometteuse lors de l'étude des réseaux neuronaux dans un cerveau de souris, par exemple.

    Lightsheet Z.1 combine les avantages de l'éclaircissement avec la microscopie de fluorescence à feuillet de lumière. Il vous permet d'obtenir des images d'échantillons de grande taille avec un rendement lumineux exceptionnel, rapidement et quasiment sans photodégradation. Vous pouvez à présent acquérir plusieurs carreaux de piles Z avec plusieurs milliers d'images de haute qualité. Une vitesse d'imagerie typique de 10-40 images par seconde réduit votre temps d'imagerie de plusieurs heures à quelques minutes.

    Utilisez Lightsheet Z.1 avec LD Plan-Apochromat 20x/1.0 pour réaliser des expériences avec un tissu éclairci par le fluide Scale (Hama et al, Nat Neurosci. 2011), dont l'indice de réfraction est n=1,38. Si votre fluide d'éclaircissement aqueux a un indice de réfraction n=1,45, vous pouvez choisir soit l'optique de détection Lightsheet Z.1 20x/1.0 (optimisé pour FocusClear™ de CelExplorer Labs, http://www.celexplorer.com, le fluide d'enrobage pour CLARITY (Chung et al, Nature 2013), soit l'optique de détection Lightsheet Z.1 5x/0.16 pour étudier votre échantillon.

    Le porte-échantillon avec son interface facile d'accès vous apporte la souplesse nécessaire pour adapter la mise en place de l'échantillon à vos besoins spécifiques. Différents adaptateurs supporteront votre échantillon par le dessous ou vous permettront de monter l'échantillon suspendu par le dessus : vous disposez toujours de la liberté de choisir l'angle de vision parfait.

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  • Applications

    Un nouveau monde de la microscopie par fluorescence

    Réalisez des expériences précédemment impossibles

    Puisque Lightsheet Z.1 représente la méthode la moins brutale pour observer le développement d'échantillons vivants, il vous donne accès à un monde totalement nouveau d'expériences pour vos recherches.

    Voici quelques exemples seulement des applications de la microscopie à feuillet de lumière auxquelles vous avez maintenance accès.

    Morphogénèse et embryogenèse

    Réalisez l'imagerie par fluorescence d'échantillons spatiotemporels à l'intérieur des cellules pendant l'embryogenèse des organismes témoins tels que le poisson zèbre et la Drosophila melanogaster.

    Organogénèse et dynamique cellulaire

    Imagerie rapide de la dynamique cellulaire dans les embryons et les petits organismes comme la migration des cellules, le développement cardiaque, la circulation sanguine, le développement vasculaire, le développement neurologique ou l'imagerie du calcium.

    Cultures cellulaires 3D

    Profitez de l'imagerie 3D en direct des cultures cellulaires, sphéroïdes et kystes, cultures tissulaires et organotypiques. Utilisez vos images pour analyser la migration cellulaire, les modèles d'expression et la prolifération cellulaire.

    Imagerie d'échantillons éclaircis optiquement

    Imagerie d'un échantillon fixé marqué par fluorescence (coupes de tissus, cerveau de souris, embryons, organes, sphéroïdes et biopsies) qui ont été éclaircis optiquement avec des fluides d'éclaircissement aqueux ayant des indices de réfraction n = 1,38 ou n = 1,45. Optimisé soit pour Scale A2, n=1,38, (Hama et al, Nat Neurosci., 2011) ou FocusClear™ (par CelExplorer Labs, http://www.celexplorer.com) n=1,45, le fluide d'enrobage pour CLARITY (Chung et al, Nature 2013).

    Plantes

    Observez les processus de développement sensibles et réalisez des mesures physiologiques.

    Imagerie d'organismes marins

    Utilisez Lightsheet Z.1 pour l'imagerie à fluorescence des organismes marins tels que les ciones, les calamars, le plancton et les vers plats.

    Caractéristiques structurelles des spécimens vivants marqués par fluorescence

    Faites l'acquisition d'images détaillées du volume des échantillons immobilisés et vivant, par exemple le poisson zèbre et le médaka.

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  • Imagerie 3D

    Observez l'imagerie 3D par le biais de la technologie Lightsheet Z.1

    Parcourez la liste de diffusion pour observer le travail des scientifiques qui utilisent Lightsheet Z.1

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  • Concept

    Acquisition de données rapide à haut rendement lumineux

    La microscopie de fluorescence à feuillet de lumière ou LSFM divise l'excitation de fluorescence et la détection en deux trajets de lumière séparés, avec l'axe d'éclairage perpendiculaire à l'axe de détection. Cela signifie que vous éclairez une seule section mince de votre échantillon à un moment donné, générant ainsi une coupe optique en excitant seulement la fluorescence du plan focal. Aucun pinhole ni traitement d'images n'est nécessaire pour la microscopie à feuillet de lumière.

    La lumière provenant du plan focal est collectée sur les pixels d'une caméra plutôt que pixel par pixel comme, par exemple, dans des approches de microscopie confocale ou à balayage laser. La mise en parallèle de la collecte des images sur une caméra vous permet de collecter des images plus rapidement et avec moins de lumière d'excitation que vous le feriez avec de nombreuses autres techniques de microscopie.

    En résumé, la LSFM (ou « LightSheet Fluorescence Microscopy » ou microscopie à feuillet de lumière) combine l'effet de coupe optique avec l'acquisition d'image en parallèle à partir du plan focal complet. L'imagerie 3D devient ainsi extrêmement rapide et avec un rendement lumineux très élevé.

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  • Téléchargements

    ZEISS Lightsheet Z.1

    Light Sheet Fluorescence Microscopy for Multiview Imaging of Large Specimens

    Page(s): 21
    Volume de fichier: 4.158 kB

    Application Note: Improved Imaging of Cleared Samples with ZEISS Lightsheet Z.1

    Refractive Index on Demand

    Page(s): 7
    Volume de fichier: 664 kB

    Application Note: Fast Imaging of Cellular Spheroids with Light Sheet Fluorescence Microscopy

    Application Note

    Page(s): 6
    Volume de fichier: 825 kB

    Lightsheet.Z1

    Imaging Biological Samples – a Reference List

    Page(s): 6
    Volume de fichier: 1.142 kB

    Application Note: Adjusting Refractive Index for Clearing Applications

    Page(s): 5
    Volume de fichier: 1.149 kB

    Technology Note: Control of External Devices During Time Series Acquisition with ZEISS Lightsheet Z.1

    Integration of Daylight Illumination into Time Lapse Experiments

    Page(s): 6
    Volume de fichier: 1.862 kB

    White Paper: Sample Preparation for Light Sheet Microscopy

    Protocols and Guidelines for ZEISS Lightsheet Z.1

    Page(s): 34
    Volume de fichier: 1.285 kB

    Beampath -ZEISS Lightsheet Z.1

    Multiview Imaging of Large Specimens

    Page(s): 1
    Volume de fichier: 162 kB

    Quick Guide: ZEISS ZEN for Lightsheet Z.1 - Multiview Experiments with Groups

    Page(s): 5
    Volume de fichier: 416 kB

    Quick Guide: ZEISS ZEN for Lightsheet Z.1 - Interactive Registration

    Page(s): 5
    Volume de fichier: 398 kB

    Quick Guide: ZEISS Lightsheet Z.1

    Stitching with arivis Vision4D ZEISS Edition

    Page(s): 8
    Volume de fichier: 3.194 kB

    Article :
    Photonik international 2013 (2,2 Mo)
    Olaf Selchow, Jan Huisken : Light sheet fluorescence microscopy and revolutionary 3D analyses of live specimens

Sample: courtesy of O. Efimova, National Research Center “Kurchatov Insitute”, Moscow, Russia.

Hippocampe de souris, éclairé optiquement dans l'agent LUMOS. Le traitement des données et le rendu 3D ont été réalisés avec arivis Vision4D™

Sample: courtesy of O. Efimova, National Research Center “Kurchatov Insitute”, Moscow, Russia.

Cerveau de souris, éclairé optiquement dans l'agent LUMOS. L'assemblage en mosaïque et le rendu de volume 3D ont été réalisés avec arivis Vision4D™

Sample: courtesy of O. Efimova, National Research Center “Kurchatov Insitute”, Moscow, Russia.

Cerveau de souris, éclairé optiquement dans l'agent LUMOS. L'assemblage en mosaïque et le rendu de volume 3D ont été réalisés avec arivis Vision4D™

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