Apotome.2

Introduction

Créez des coupes optiques de vos échantillons fluorescents – exemptes de lumière diffusée. Avec une illumination structurée, vous savez que seul le plan focal apparaît dans votre image : Apotome.2 reconnaît le grossissement et amène la grille appropriée dans le trajet du faisceau. Le système calcule ensuite votre coupe optique à partir de trois images avec des positions de grille différentes, sans délai. Une méthode totalement fiable pour empêcher la lumière diffusée hors plan focal, même dans vos échantillons les plus épais. Utilisez votre système avec la facilité habituelle. Vous obtenez des images fortement contrastées avec la meilleure résolution possible – des coupes optiques tout simplement exceptionnelles.

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Le didacticiel commence par une animation de l’ApoTome ZEISS dans l'action sélectionnée dans la partie supérieure gauche de la fenêtre. Sous le modèle de l’ApoTome se trouve une vue en coupe du trajet de la lumière illustrant la grille d'ouverture et la plaque de verre optique rotative qui dirige une projection de la grille à travers l'échantillon. La fenêtre de prévisualisation (Preview Window) présente une projection de la grille sur l'échantillon telle qu'elle serait observée dans le logiciel. Pour utiliser le didacticiel, servez-vous des boutons Position ApoTome pour insérer la grille ApoTome (Position 2) et la retirer (Position 1) du trajet de la lumière. Lorsque l'ApoTome est inséré dans le trajet de la lumière, vous pouvez utiliser les boutons Grid Projection pour commander manuellement la position de la projection à l'aide du curseur Grid Projection Control. Après avoir retiré la grille à l'aide des boutons de commande de position, vous pouvez modifier l'ouverture du diaphragme à l'aide du curseur Iris Diaphragm Control.
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Didacticiel : Illumination structurée avec l’Apotome ZEISS

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Points essentiels

Des images parfaites – avec tous les grossissements

Parce que vos applications ont besoin d'objectifs différents, vous avez besoin d'un système qui vous donne la meilleure résolution pour chacun d'entre eux. Apotome.2 utilise automatiquement la grille appropriée pour votre objectif en la sélectionnant parmi trois grilles aux fréquences différentes. Avec une épaisseur de coupe optique de l'ordre d'une unité Rayleigh, vous disposez d'images tout simplement exceptionnelles.

Des résultats optimaux – Libre choix de la source lumineuse et des colorants

Depuis l'éclairage HBO conventionnel jusqu'à la lampe à halogénure métallique sans réglage HXP 120 C et Colibri.2, la source d'éclairage à LED qui ménage vos échantillons : avec Apotome.2 vous utilisez exactement la lumière dont vous avez besoin. Apotome.2 vous donne également le choix des fluorophores. C'est vous, et non pas la technologie, qui décidez de travailler avec DAPI, FITC, Rhodamin, Cy5 ou avec des colorants vitaux comme GFP ou mRFP. Il vous suffit de changer de filtre et votre système déplace automatiquement la grille dans la position correcte. Du DAPIau Cy5, vous obtenez des coupes optiques parfaites pour l'imagerie muliticanale.

Des images nettes – même avec des spécimens épais

L'épaisseur de coupe optique de l'ordre d'une unité Rayleigh, une valeur qui est synonyme de résolution axiale élevée avec un bon rapport signal/bruit. Apotome.2 accroît la résolution dans la direction Z par rapport à la microscopie à fluorescence conventionnelle : vous obtenez des coupes optiques exceptionnelles qui permettent un rendu 3D, même à partir d'échantillons épais.

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Applications

Comparaison de la coupe optique (à droite) avec la microscopie à champ large (à gauche). Embryon de souris, coupe de tissu, vert : GFP, rouge : Cy3. Objectif : Plan APOCHROMAT 40 x/1.3 huile. Avec l'aimable autorisation de N. Büttner, T. Vogel, Centre for Anatomy, Université de Göttingen, Allemagne.

Hippocampe de rat, triple fluorescence, projection maximale d'une pile d'images 3D. Objectif : Plan-APOCHROMAT 63x/1.4. Avec l'aimable autorisation de E. Fuchs & S. Bauch, DPZ Göttingen, Allemagne.

Embryon de drosophile, vert : HRP, rouge : marqueur glia, pile Z de 100µm. Avec l'aimable autorisation de C. Klämbt, Institute for Neurobiology, Université de Münster, Allemagne.

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ZEISS Apotome.2

Optical Sections in Fluorescence Imaging

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