Celldiscoverer 7 – Votre plateforme automatisée pour l'imagerie de cellules vivantes

Ajout d'efficacité à votre imagerie de fluorescence

Avec Celldiscoverer 7, vous pouvez combiner la facilité d'utilisation d'un microscope automatisé avec la qualité d'image et la souplesse d'un microscope de recherche inversé classique. Celldiscoverer 7 se calibre, détecte et se concentre sur vos échantillons tandis que l'optique s'ajuste. Que vous travailliez avec des cultures de cellules 2D ou 3D, des coupes de tissus ou de petits organismes modèles, vous obtiendrez de meilleures données en moins de temps grâce à cette plate-forme automatisée fiable d'imagerie cellulaire.

Vous pouvez désormais y ajouter le nouveau LSM 900 avec l'Airyscan 2 pour imager en douceur les processus dynamiques dans vos échantillons vivants avec les taux de tramage les plus élevés en super-résolution.

Points forts

Votre microscope automatisé flexible

Celldiscoverer 7 est un système d'imagerie de cellules vivantes automatisé haut de gamme entièrement intégré. Adaptez le système à vos applications avec diverses options d'incubation et de détection.
Optez pour des caméras sCMOS ou EMCCD rapides et sensibles lorsque vous effectuez des expériences de cellules vivantes exigeantes et des enregistrements rapides en temps. Pour les applications de criblage à haut débit, choisissez une caméra à plage dynamique élevée avec un grand champ de vision.
Ajoutez LSM 900 avec l'Airyscan 2 pour obtenir de meilleures données d'échantillons tridimensionnels

Celldiscoverer 7 detail

Obtenez des données de qualité à partir vos échantillons

Une mise au point matérielle détecte et maintient la mise au point automatiquement après avoir détecté l'épaisseur et les propriétés optiques du porte-échantillon pour des images à long terme exigeantes.
Les objectifs Autocorr corrigent les aberrations sphériques pour offrir un contraste net et une haute résolution.
Le microscope automatisé Celldiscoverer 7 offre une gamme d'options d'incubation intégrées pour créer le bon environnement pour vos cellules vivantes.

Celldiscoverer 7 – autoimmersion zoom-in

Obtenez facilement des résultats reproductibles

Les routines d'étalonnage automatique garantissent des résultats reproductibles.
Avec la reconnaissance de code à barres, vous pouvez identifier votre échantillon, porte-échantillon et même le type d'expérience.
Si vous ne travaillez pas avec des codes à barres, un aperçu automatique identifiera le support d'échantillons et le calibrera.

Lateral line primordium migration and deposition of immature neuromasts in a Zebrafish embryo (Danio rerio). © Courtesy of J. Hartmann and D. Gilmour, EMBL, Heidelberg, Germany

LSM 900 avec Airyscan 2

LSM 900 Beampath

La vie se passe en 3D - et votre recherche nécessite souvent un sectionnement optique pour imager vos échantillons vivants avec le meilleur contraste et la meilleure résolution possible. Vous pouvez maintenant ajouter LSM 900 avec Airyscan 2 à votre Celldiscoverer 7. Vous bénéficiez du meilleur des deux mondes : facilité d'utilisation et automatisation à partir d'une plate-forme de microscope entièrement intégrée et de l'excellente qualité d'image confocale et de la flexibilité de la famille LSM 9 avec Airyscan 2. Vous effectuez une imagerie de cellules vivantes à super-résolution avec une amélioration de résolution jusqu'à 1,5 ×. Et vous séparez facilement plusieurs étiquettes avec une imagerie spectrale. Vous pouvez maintenant analyser les processus dynamiques dans des échantillons vivants avec la photomanipulation pour FRAP, FRET ou des techniques connexes. Il n’a jamais été aussi facile de connecter avec précision des images larges et confocales. L'acquisition en mode mixte rapide simplifie et accélère votre flux de travail et vous donne un aperçu unique de votre échantillon.

Objectifs Autocorr

Avec Celldiscoverer 7 vous êtes libre d'utiliser des boîtes de Petri, des glissières de chambre, des plaques multi-puits, en plastique ou en verre, des fonds de vaisseaux minces ou épais, une jupe basse ou des plaques de jupe haute. La reconnaissance automatique des échantillons permet de détecter toutes les caractéristiques pertinentes du navire pendant le chargement de votre échantillon. L'objectif Autocorr ajuste l'anneau de correction de l'objectif pour compenser les aberrations sphériques. "Find Focus" place automatiquement votre échantillon au focus et "Definite Focus" le maintient en place. Obtenez des images nettes avec une phototoxicité faible à partir de l'intérieur de votre échantillon.

The images show tubulin in FluoCell prepared slide #1. © Courtesy of Invitrogen, Thermo Fisher Scientific Inc. Left image shows spherical aberration due to unadjusted optics.

Right image shows the same structure using an Autocorr objective. The correction results in increased contrast, resolution and intensity, providing low phototoxicity.

Autoimmersion

Dans les sciences de la vie, la biologie cellulaire ou les applications de dépistage, vos échantillons sont principalement constitués d'eau et/ou seront montés dans des solutions aqueuses. Celldiscoverer 7 associe un objectif d'immersion en eau 50x exceptionnel avec une alimentation et un retrait automatiques rapides de l'immersion. Une membrane en silicone élastique scelle simultanément la chambre d'échantillonnage afin d'éviter tout écoulement d'air inutile tout en protégeant le système des éventuels déversements de liquides. De plus, Celldiscoverer 7 surveille automatiquement l'immersion et ajoute de l'eau, au besoin. Avec ce microscope automatisé, vous pouvez effectuer des expériences de cellules vivantes non biaisées à 37 ° C sur plusieurs jours ou effectuer de vastes processus de balayage sur des plaques à puits multiples.

Trouvez le focus – Maintenez le focus

Screenshot ZEN Celldiscoverer 7, Find Focus - Keep Focus

Utilisez la fonction "hardware" Find Focus pour centrer automatiquement votre échantillon et trouver votre région d'intérêt. Sélectionnez Definite Focus pour maintenir la position focale tout au long de vos expériences. Ou combiner les deux méthodes: Le microscope automatisé Celldiscoverer 7 peut automatiquement créer des cartes de mise au point pour les positions multiples dans les expériences à long terme lapse-temps.

Capitalisez sur la technologie LED pour l'imagerie cellulaire

Celldiscoverer 7 illumination, schematic drawing

Utilisez les avantages de la technologie LED pour un éclairage efficace avec une faible phototoxicité, des temps de commutation rapides et une stabilité à long terme. C'est ce qui permet une imagerie douce, un débit accru et des résultats reproductibles. L'unité d'excitation de fluorescence combine jusqu'à sept LED pour une flexibilité maximale dans le choix des colorants - du bleu profond au rouge lointain.

Applications

Des résultats reproductibles en toute simplicité

Dès que vous commencez à numériser, des routines d'étalonnage automatiques prennent le relais pour garantir des résultats reproductibles. Vérifiez l'état actuel et suivez les progrès de vos expériences sur l'écran tactile.

Avec la reconnaissance de code à barres, vous pouvez identifier votre échantillon, le support d’échantillon et même le type d’expérience. Si vous ne travaillez pas avec des codes à barres, une analyse de prévisualisation automatique identifiera le porte-échantillon et le calibrera. Le service prédictif ZEISS offre des performances durables et optimales pour une disponibilité accrue du système et des résultats fiables.

Fixed starlet sea anemone (Nematostella vectensis)

Anémone de mer fixe (Nematostella vectensis) colorée au Hoechst (noyaux) et à la Phalloïdine (actine). Vue latérale imagée avec une combinaison du mode PGC (Phase Gradient Contrast) basé sur l'appareil photo (à gauche) et du mode de sensibilité élevée avec Airyscan 2 (au centre). Projection d'intensité maximale de 19 plans z.

Fixed starlet sea anemone (Nematostella vectensis) stained with Hoechst (nuclei) and Phalloidin (actin).

Les détails de l'image fine et le rapport signal sur bruit élevé sont clairement visibles sur l'insert dans l'image en haut à droite, montrant une vue agrandie d'une zone tentaculaire. © Gracieuseté de A. Stokkermans, Groupe Ikmi, EMBL, Heidelberg, Allemagne

Vidéo: Vue de dessus d'un jeune animal, montrant la bouche et quatre boutons de tentacule. Projection d'intensité maximale de 69 plans z imagés avec le multiplex Airyscan 2. Les images ont été acquises à l’aide de l’objectif à immersion dans l’eau, avec un grossissement total de 25 × et une ouverture numérique de 1,2.

Migration de primordium de la ligne latérale et dépôt de neuromastes immatures dans un embryon de poisson zèbre (Danio rerio). Les animaux ont été anesthésiés et inclus en utilisant de l'agarose faiblement concentré dans un petridish à fond de verre.

L’imagerie initiale par caméra a permis une navigation rapide et facile des échantillons (haut) en combinant le PGC (Phase Gradient Contrast) et l’acquisition de fluorescence.
Une imagerie haute résolution ultérieure avec Airyscan 2 en mode multiplex a été réalisée sur les positions individuelles identifiées sur l'image grand champ (cases blanches).

Projections d'intensité maximale d'un neuromast immature (127 plans z).

Projections d'intensité maximales de l'extrémité du primordium de la ligne latérale migrant à travers l'animal (plans z).

Vert: LYN-eGFP (mebranes); Rouge: tagRFP-T-UTRCH (actine).

L’acquisition d’images douce et rapide inhérente au mode Airyscan 2 Multiplex est très bénéfique pour ce type d’application. L’animal n’est pas perturbé par l’imagerie, alors que des images avec un rapport signal sur bruit très élevé ainsi que le niveau de détail peuvent être acquises simultanément.

Fibroblastes pulmonaires primaires colorés au rouge mitotracker (mitochondries) et à un marqueur ADN (noyaux).

L’acquisition combine sans le moindre problème deux modes d’imagerie: les canaux fluorescents ont été capturés en mode confocal à l’aide de détecteurs GaAsP très sensibles, tandis que le PGC (Phase Gradient Contrast) est basé sur une caméra.

Un timelapse de 2,5 h a été acquis en utilisant un grossissement de 40 × avec une ouverture numérique de 0,95.

Primary lung fibroblasts stained with mitotracker

Organoïde d'une lignée cellulaire du cancer du sein humain. Les cellules expriment H2B (nucelei) et mCherry marqués par GFP (coloration cytoplasmique représentée ici en gris pour une meilleure visualisation).

Plusieurs organites ont été cultivés dans une plaque multipuits avec du Matrigel. La navigation initiale de l'échantillon a été réalisée en utilisant la lumière transmise à un faible grossissement de 2,5 × pour identifier les organoïdes intéressants.

Par la suite, des images haute résolution ont été acquises à l’aide de l’objectif à immersion dans l’eau avec un grossissement total de 50 ×. 61 plans z ont été acquis à l’aide de ZEISS Celldiscoverer 7 avec LSM 900 et Airyscan 2 en mode Multiplex.

On peut clairement apprécier la robustesse de l’imagerie étant donné que Matrigel n’est pas un support optique idéal et que l’organoïde a été imagé à une distance de plusieurs micromètres de la lamelle.

Système de la trachée dans un embryon de mouche des fruits vivant (Drosophila melanogaster) imagé avec ZEISS Celldiscoverer 7 avec LSM 900 et Airyscan 2 en mode multiplex. Un objectif à immersion dans l’eau avec un grossissement de 25 × et une ouverture numérique de 1,2. en combinaison avec une acquisition multi-mosaïque (8 mosaïques, 143 plans z) a été utilisée.

CD4-mIFP sous un promoteur trachéal couleur codée pour la profondeur.

Caenorhabditis elegans germinale. Les nématodes décapités étaient localisés en mode champ large avec un faible grossissement de 2,5 × (lumière transmise et fluorescence, DAPI; à gauche). Cela a permis à un flux de travail facile et pratique d'identifier les zones d'intérêt pour une imagerie haute résolution rapide ultérieure en mode multiplex pour ZEISS Celldiscoverer 7 avec LSM 900 et Airyscan 2 (à droite). Une magnification de 25 × avec immersion dans l'eau et NA 1.2 a été utilisée pour générer un empilement en z de 62 plans.

Bleu: DAPI (ADN);

Vert: Alexa 488 (sites de croisement);
Orange: Alexa 546 (complexe synaptonémal);
Rouge: Alexa 647 (axe du chromosome).

Les chromosomes individuels dans différentes cellules méiotiques sont clairement distinguables.