Découvrez la nouvelle
Famille LSM 9
live @ FOM 2019

ZEISS LSM 900 avec Airyscan 2

Votre confocal compact pour l'imagerie multiplex

Que recherchez-vous dans l'imagerie confocale ? Quelle que soit votre question scientifique, vous souhaitez commencer avec la meilleure qualité d'image possible, ce qui signifie un contraste net et la meilleure résolution. Vous souhaitez également une sensibilité maximale pour une imagerie en douceur de vos échantillons vivants ou fixes sans blanchiment. Votre LSM 900 confocal avec Airyscan 2 possède tout cela et plus encore. Vous créez une image avec un rapport signal sur bruit (SNR) supérieur de 4 - 8 × et une super-résolution. Vous bénéficiez également des fréquences d'images les plus élevées : le nouveau mode Multiplex pour Airyscan 2 ajoute des schémas de détection intelligents pour l'acquisition de pixels parallèles. Vous pouvez maintenant observer les processus dynamiques chez les spécimens vivants en douceur - sans sacrifier la qualité de l'image. De plus, votre LSM 900 a vraiment une petite empreinte, se concentrant sur l’essence d’un confocal et laissant de côté une complexité inutile. Il s’intègre facilement dans votre laboratoire ou votre centre d’imagerie - et il est également facile à utiliser.

Points forts

  • Obtenez de meilleures données plus rapidement

Associez l'excellente qualité d'image de votre LSM 900 confocal au nouveau mode Multiplex pour Airyscan 2 afin d'obtenir plus d'informations en moins de temps. Vous pouvez maintenant utiliser des schémas de détection intelligents pour imager vos échantillons tridimensionnels difficiles avec les taux de tramage les plus élevés et avec une résolution accrue de 140 nm. La vitesse et la douceur du détecteur de zone sensible Airyscan complètent ce confocal à balayage ponctuel compact et vous permettent d’imprimer vos échantillons les plus exigeants avec un rapport signal sur bruit de 4 à 8 × plus.





HeLa cells stained for DNA (blue, Hoechst 44432), microtubules (green, anti-tubulin, alpaca anti-mouse

HeLa cells stained for DNA (blue, Hoechst 44432), microtubules (green, anti-tubulin, alpaca anti-mouse-alexa 488) and F-actin (red, phalloidin-Abberior STAR Red). Acquired with Multiplex mode for ZEISS Airyscan. © Courtesy of A. Politi, J. Jakobi and P. Lenart, MPI for Biophysical chemistry, Göttingen, Germany.

  • Augmentez votre productivité

Votre LSM 900 avec Airyscan 2 n’est pas seulement un confocal compact, il est également très facile à utiliser. La configuration est simple avec le logiciel d’imagerie ZEN, même pour les expériences complexes d’imagerie de cellules vivantes confocales. De nombreuses aides logicielles allégent votre charge de travail et vous permettent d'obtenir des résultats reproductibles dans les plus brefs délais. Smart Setup et le nouveau Sample Navigator vous permettent de trouver des régions d’intérêt et de les représenter rapidement, vous laissant ainsi plus de temps pour acquérir des données. Le traitement direct permet l'acquisition parallèle et le traitement des données. ZEN Connect vous permet de rester au fait de tout, à tout moment, aussi bien lors de la création d'image que plus tard, lors du partage de toute l'histoire de votre test. Il est facile de superposer et d'organiser des images à partir de n'importe quelle source.

Découvrez comment ZEN Connect vous aide à conserver votre contexte tout en créant une image. De l'acquisition d'une image de synthèse à la définition du retour sur investissement même lors du changement entre différents systèmes d'imagerie. Vous gagnez du temps et restez toujours au fait des choses.

  • Un faible encombrement pour une meilleure qualité d'image

Votre LSM 900 regorge de solutions innovantes et intelligentes pour produire la meilleure qualité possible en imagerie confocale de cellules vivantes. L'élégant trajet du faisceau est conçu pour offrir une grande flexibilité spectrale, chaque composant étant optimisé pour une sensibilité et un contraste optimaux. Compte tenu de son faible encombrement et de sa complexité réduite, vous économiserez un espace de travail précieux, réduirez le temps nécessaire à la formation des utilisateurs et réduirez le coût de possession - c'est une très bonne nouvelle pour les installations d'imagerie.

Cell division of LLC-PK1 cells, alpha-tubulin (mEmerald, magenta) and H2B (mCherry, green). With the new Multiplex mode for ZEISS Airyscan a Z-stack of 52 slices was captured every 40 seconds for a total of 40 minutes.

Un trajet optique optimisé

Offrant un maximum de flexibilité

Le trajet optique compact avec un minimum d'éléments optiques est conçu pour une efficacité maximale. La lumière d'émission de fluorescence traverse le séparateur de faisceaux dichroïque principal avec son excellente suppression au laser pour offrir un contraste suprême. Jusqu'à deux dichroïques à séparateur de faisceau variable (VSD) brevetés détournent les parties spectrales de la lumière d'émission. Vous pouvez définir jusqu'à trois détecteurs - multialcalin, GaAsP ou Airyscan 2. Les PMT GaAsP - c'est-à-dire les tubes photomultiplicateurs à phosphure d'arséniure de gallium - affichent des rendements de captage de lumière élevés sur une large plage spectrale. Leurs faibles niveaux de bruit dans l'obscurité en font également l'outil idéal pour détecter les signaux faibles.

Profitez d'une qualité d'image exceptionnelle basée sur un superbe rapport signal / bruit (SNR). Vous pouvez utiliser ce gain de RSN pour augmenter la productivité en accélérant les numérisations tout en préservant une excellente qualité d'image. Vous pouvez également tirer parti des faibles puissances laser requises dans les applications d’imagerie de cellules vivantes confocales pour éviter le photoblanchiment et la phototoxicité. Ou simplement détecter des signaux faibles dans les cellules à faible expression. Tout cela, et vous pouvez le faire avec trois canaux confocaux spectraux simultanément.

Principe de l'Airyscan

Principle of airyscan

Les microscopes à balayage laser confocal classiques utilisent un éclairage ponctuel pour numériser l'échantillon de manière séquentielle. L'optique du microscope transforme chaque point en un disque Airy étendu (motif Airy). Un sténopé limite ensuite spatialement ce disque d’Airly afin d’empêcher la lumière floue de parvenir au détecteur. La fermeture du trou d'épingle donne une résolution plus élevée, mais au prix de détecter moins de photons - et ces photons ne peuvent pas être ramenés, par exemple. déconvolution.

Airyscan 2 est un détecteur de zone avec 32 éléments de détection disposés concentriquement. Cela vous permet d’acquérir plus du disque Airy à la fois. Le trou d'épingle confocal reste ouvert et ne bloque pas la lumière, ce qui permet de collecter plus de photons. Cela produit une efficacité lumineuse beaucoup plus grande lors de l'imagerie. Airyscan 2 vous offre une combinaison unique d’imagerie super-résolution douce et de haute sensibilité.

Comment fonctionne le nouveau mode multiplex pour Airyscan 2 ?

Regardez la bande-annonce de l'animation en mode multiplex

La famille LSM 9 avec Airyscan 2 de ZEISS vous offre désormais plus d'options pour adapter la vitesse et la résolution de l'image à vos besoins en matière d'expérimentation. Vous combinez un détecteur de zone confocale avec des schémas d'éclairage et de lecture intelligents, qui vous permettent de choisir parmi différentes options de parallélisation. Le nouveau mode Multiplex utilise les connaissances relatives à la forme du point laser d'excitation et à la localisation d'éléments de détecteur à zone unique pour extraire davantage d'informations spatiales, même pendant la lecture de pixels parallèles.

Cela permet de faire de plus grands pas lorsque vous balayez le laser d'excitation sur le champ de vision, améliorant ainsi les vitesses d'acquisition que vous pouvez atteindre. En fait, la grande quantité d'informations spatiales capturées dans le plan des trous d'épingle permet de reconstruire une image finale avec une résolution supérieure à celle de l'échantillonnage d'acquisition. Airyscan 2 en mode multiplex peut acquérir jusqu’à quatre lignes d’image de super-résolution avec un RSB élevé en un seul balayage.

LSM 900 Airyscan SR Multiplex SR-2Y Multiplex SR-4Y Multiplex CO-2Y
Parallelisation

1

2

4

2

Resolution

120/120

140/140

140/140

Confocal or better

Max. ips au max. champ de vision

0.4

0.8

3.5

3.5

Marquage des anticorps, structures fines

+++++

++++

++++

++

Marquage d'anticorps, carrelage

++

+++

+++++

+++

Imagerie de cellule vivante

++

+++

++++

+++++

Applications

ZEISS LSM 900 au travail

Drosophily embryo imaged with Multiplex Mode for LSM 900.
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COS 7 cells labelled microtubules Aairyscan-Modus

Drosophily embryo – imaged with Multiplex Mode for LSM 900.
© Courtesy of J. Sellin, LIMES, Bonn, Germany 

En comparant le champ de vision, vous pouvez créer une image en super-résolution simultanément en utilisant le mode Multiplex (à gauche) et Airyscan SR (à droite). Cellules COS 7 avec microtubules marqués (alpha-tubuline 488, verte) et actine (phalloïdine 568, rouge).

 

Migration de primordium de la ligne latérale et dépôt de neuromastes immatures dans un embryon de poisson zèbre (Danio rerio). Les animaux ont été anesthésiés et inclus en utilisant de l'agarose faiblement concentré dans un petridish à fond de verre.

L’imagerie initiale par caméra a permis une navigation rapide et facile des échantillons (haut) en combinant le contraste de gradient de phase et l’acquisition de fluorescence. Une imagerie haute résolution ultérieure avec Airyscan 2 en mode multiplex a été réalisée sur les positions individuelles identifiées sur l'image grand champ (cases blanches).

L’acquisition d’images douce et rapide inhérente au mode Airyscan 2 Multiplex est très bénéfique pour ce type d’application. L’animal n’est pas perturbé par l’imagerie, alors que des images avec un rapport signal sur bruit très élevé ainsi que le niveau de détail peuvent être acquises simultanément.

Green: LYN-eGFP (mebranes); Red: tagRFP-T-UTRCH (actin). © Courtesy of J. Hartmann and D. Gilmour, EMBL, Heidelberg, Germany


Fibroblastes pulmonaires primaires colorés au rouge mitotracker (mitochondries) et à un marqueur ADN (noyaux).

L’acquisition combine sans le moindre problème deux modes d’imagerie : les canaux fluorescents ont été capturés en mode confocal à l’aide de détecteurs GaAsP très sensibles, tandis que le contraste de gradient de phase est basé sur une caméra.

Un timelapse de 2,5 h a été acquis en utilisant un grossissement de 40 × avec une ouverture numérique de 0,95.

© Courtesy of S. Gawrzak and M. Jechlinger, EMBL, Heidelberg, Germany


Parfois, vous devez voir et évaluer vos images multimodales lors de l’acquisition afin de planifier vos prochaines étapes. ZEN vous donne plusieurs options. Vous pouvez vous asseoir devant votre ordinateur connecté pour lancer la nouvelle fonction de traitement direct permettant de traiter vos images Airyscan lors de l'acquisition.

Toutefois, l’imagerie confocale n’est qu’une partie de l’ensemble, et vous aurez peut-être besoin de données provenant de modalités d’imagerie supplémentaires pour compléter l’affichage de votre échantillon.

ZEN Connect peut rassembler des informations provenant de toutes vos expériences. Conservez le contexte de vos données en rassemblant toutes les images d'une session de test dans un même projet, dans lequel vous pouvez combiner des images de synthèse et des images haute résolution détaillées, le tout parfaitement aligné. Une fois que vous avez créé un projet, vous pouvez toujours ajouter et aligner du contenu provenant de toute autre source de création d'image, qu'elle soit ZEISS, non-ZEISS ou même des croquis et des graphiques d'analyse. Vous resterez au fait des choses à tout moment, pendant vos expériences et des mois ou des années plus tard.

Vos projets ZEN Connect conservent tous les jeux de données associés. Il n’a jamais été aussi facile de partager des résultats et de travailler en équipe avec d’autres. La puissante visionneuse intégrée 3Dxl, optimisée par arivis®, est optimisée pour restituer les grandes données d'images 3D et 4D que vous avez acquises avec votre nouveau LSM 900 rapide. Vous pouvez créer des rendus et des vidéos impressionnants pour vos réunions et conférences. Après tout, une bonne image peut en dire plus que mille mots.

Section of a Thy1-YFP mouse brain

© Courtesy of R. Hill, Yale University, New Haven, CT, USA.

Section of a Thy1-YFP mouse brain
Section of a Thy1-YFP mouse brain - single neuron

Section d'un cerveau de souris Thy1-YFP. Thy-1 (vert) participe à la communication des cellules du système nerveux. Image d’ensemble (A) acquise sur ZEISS Axio Scan.Z1. L'encart montre des retours sur investissement agrandis représentés sur ZEISS LSM avec Airyscan (B). Le réseau neuronal est clairement visible. La profondeur de la pile Z est codée par couleur. (C) montre un seul neurone.


The micrograph shows a Lilium auratum pollen grain, acquired with Airyscan 2 in Multiplex mode.

The micrograph shows a Lilium auratum pollen grain, acquired with Airyscan 2 in Multiplex mode.
© Courtesy of Jan Michels, Zoological Institute, Kiel University

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Les noyaux de cellules HeLa vivantes ont été marqués avec 5’-610CP-Hoechst (Chem.Sci. 2019, 10, 1962 - 1970). Le colorant est ajouté au milieu de culture cellulaire à une concentration définie. L'expérience de blanchiment (FRAP) confirme qu'il faut environ 15 minutes au colorant pour marquer efficacement l'ADN. La série chronologique est enregistrée pendant 13,5 minutes avec 1 image par seconde; avec l'événement de blanchiment dans la région étiquetée après les 10 premières images. © Gracieuseté de P. Lenart, MPI pour la chimie biophysique, Göttingen, Allemagne

Téléchargements

ZEISS LSM 900 with Airyscan 2

Your Compact Confocal for Fast and Gentle Multiplex Imaging

Page: 29
Volume de fichier: 8109 kB

The Basic Principle of Airyscanning

Page: 22
Volume de fichier: 1472 kB

ZEISS LSM 9 Family with Airyscan 2

Multiplex Mode for Fast and Gentle ConfocalSuperresolution in Large Volumes

Page: 11
Volume de fichier: 3114 kB

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