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Produits et composants de microscopie de fluorescence

Protéines fluorescentes

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Microscopie de fluorescence

Tout est une question de fluorophore

Vous avez le choix entre les centaines de types de fluorophores différents qui sont à votre disposition. Les dérivés de GFP et de RFP sont clonés à des gènes intéressants spécifiques dans de nombreux organismes modèles. Les colorants inorganiques sont conjugués à des anticorps créés contre presque n'importe quel épitope. Avec des couleurs fluorescentes allant du proche ultraviolet jusqu'au rouge lointain, vous êtes en mesure d'étiqueter spécifiquement et d'examiner une vaste combinaison de différentes protéines et structures au sein du même échantillon. Cela va des expériences simples à deux couleurs jusqu'à l'étiquetage élaboré de dix structures ou plus. Une localisation précise exige un système de microscope qui excite modérément une grande variété de fluorophores et détecte une émission avec une haute résolution et une grande sensibilité. ZEISS propose une vaste gamme de produits dédiés à la microscopie de fluorescence. Ces microscopes sont parfaitement adaptés à votre application.

Inspection des signaux de fluorescence

En commençant par les applications de fluorescence en culture cellulaire, par exemple l'évaluation des taux de transfection, Axio Vert.A1 produit un éclairage à LED doux sans composantes UV indésirables pour protéger vos cultures. Pour le tri, la sélection et l'imagerie multi-dimensionnelle de vos modèles d'organismes transgéniques, Axio Zoom.V16 est optimisé pour une excellente luminosité de fluorescence tout en offrant un large champ de vision.

Des plateformes flexibles pour une microscopie de fluorescence à hautes performances

ZEISS propose des plateformes de microscopie flexibles qui peuvent être complétées par des techniques de coupe optiques de pointe. Celles-ci incluent l'illumination structurée, la microscopie confocale à balayage laser, la technologie du disque rotatif, la microscopie multiphotons et le TIRF. Choisissez la plateforme optimale pour votre application de microscopie de fluorescence à hautes performances. Des objectifs avancés, des trajets de faisceau optimisés, des ensembles de filtres à haute efficacité et la motorisation permettent une détection de fluorescence rapide et sensible.
La plateforme de microscope droit Axio Imager vous fournit des couleurs fluorescentes vives via une excellente optique et des performances exceptionnelles. Observez des coupes de tissus, des tranches de cerveau et des échantillons FISH. La plateforme de microscope inversé Axio Observer avec option incubateur est parfaitement adaptée à vos applications de cellules vivantes. Une tourelle porte-réflecteur rapide, des obturateurs à grande vitesse, des jeux de filtres à haute efficacité et un gestionnaire de lumière réduisent l'exposition inutile à la lumière.

Toutes les options d'éclairage dont vous avez besoin

Choisissez parmi différentes sources de lumière pour adapter votre plateforme ZEISS à vos besoins spécifiques. La source de lumière à LED Colibri.2 permet la sélection d'une longueur d'onde spécifique, le contrôle de l'intensité et un mélange flexible de différentes longueurs d'onde. Elle convient ainsi idéalement pour les applications de fluorescence complexes à grande vitesse. La combinaison de Colibri.2 avec HXP 120 vous permet de garder une certaine souplesse à l'égard des colorants pour lesquels il n'existe encore aucune LED aujourd'hui.

Confocal – Depuis la localisation précise jusqu'à la dynamique

L’augmentation de la résolution et du contraste par sectionnement optique avec un microscope confocal à balayage laser vous permet de localiser précisément vos signaux fluorescents. De plus, grâce à l'excitation laser, vous pouvez examiner bien plus qu'un simple emplacement : appliquez des expériences de photoactivation et de photoblanchiment comme FRAP pour mesurer la dynamique des protéines comme leur mobilité et leurs taux de diffusion dans des échantillons vivants. Faites évoluer votre plateforme de microscope avec LSM 800 et obtenez ainsi un système de balayage laser facile à utiliser qui rivalise avec les systèmes confocaux haut de gamme. Avec LSM 800 ou LSM 880, vous atteignez une sensibilité extrêmement élevée grâce à une technologie de détecteur améliorée. Réalisez de l'imagerie spectrale, du comptage de photons et capturez jusqu'à 10 canaux simultanément. Pour mettre au point votre expérience, il vous suffit de choisir vos fluorophores. Le module Smart Setup de la suite d'imagerie numérique ZEN sélectionne ensuite automatiquement les filtres et les lasers optimisés pour une imagerie rapide, le meilleur signal ou le meilleur compromis.

 

Observez le développement en direct avec la microscopie de fluorescence à feuillet de lumière

L'imagerie en fluorescence des organismes vivants sur une période prolongée est un véritable défi. La phototoxicité doit être réduite à un niveau minimum. Lightsheet Z.1 est une solution d'imagerie rapide et en douceur qui protège vos échantillons vivants et vos fluorophores. La séparation des trajets de lumière de l'excitation et de l'émission permet un éclairage exclusif du plan de mise au point, tandis qu'un détecteur à base de caméra permet une imagerie rapide avec de faibles niveaux de la lumière d'excitation. Vous observez le développement de l'embryon, l'organogenèse et la dynamique des cellules avec pratiquement aucune phototoxicité ou ni aucun blanchiment. Vous pouvez en outre utiliser Multiview pour créer des modèles 3D à partir d'échantillons de grand volume.

Numérisation automatique des lames – Fluorescence à haut débit

Pour la recherche sur le cancer et des expériences d'hybridation in-situ en fluorescence (FISH), vous avez souvent besoin d'examiner un grand nombre de lames. La numérisation de lame multicanal rapide en fluorescence avec Axio Scan.Z1 accélère votre workflow. Des deux roues de filtre à grande vitesse et des caméras sensibles permettent une acquisition rapide avec des temps d'exposition courts et protègent vos échantillons. Comme il utilise des jeux de filtres à triple et quadruple bande avec Colibri.2 comme source de lumière de fluorescence, Axio Scan.Z1 effectue des changements de canal rapides, en quelques millisecondes à peine. Obtenez une qualité d'image exceptionnelle avec des objectifs plan-apochromatiques avec des ouvertures jusqu'à 0,95. Les assistants de numérisation de lame ZEN dédiés vous permettent de configurer votre expérience en souplesse et facilement grâce aux profils de numérisation et à la fonction intuitive Smart Setup.

Augmentez votre résolution

Les surligneurs optiques sont une famille récemment établie de protéines fluorescentes dont les propriétés changent lorsqu'elles sont exposées à la lumière ultraviolette. Ces types de fluorophores ont contribué à l'invention de la méthode de superrésolution PAL-M de ZEISS, laquelle repose sur la capture de l'image de quelques molécules à la fois seulement en frappant l'échantillon avec de très faibles niveaux de lumière d'activation. Vous pouvez ainsi déterminer l'emplacement XY exact de ces molécules. En répétant cette opération des milliers de fois, vous obtenez une image finale avec une résolution allant jusqu'à 20 nm, proche de celle des systèmes de microscopie électronique. La plate-forme clé en main ELYRA est le seul système à superrésolution existant qui vous permet de combiner 2 techniques différentes, PAL-M et SR-SIM. Cette technique est basée sur illumination structurée générée par laser et offre une grande flexibilité. Le SR-SIM est compatible avec les fluorophores et les protocoles de coloration conventionnels et permet une coupe Z avec jusqu'à deux fois la résolution latérale et axiale d'un microscope optique classique. ELYRA vous permet de choisir la technique de superrésolution optimale pour votre échantillon.
Et si vous avez besoin d'encore plus de résolution, ZEISS vous permet de combiner la puissance de résolution exceptionnelle de la microscopie électronique avec des structures marquées par fluorophores dans votre microscope à fluorescence. Avec notre solution flexible Shuttle & Find pour microscopie optique et électronique corrélative (CLEM), vous repositionnez votre région d'intérêt dans le microscope électronique après la détection de vos signaux de fluorescence dans le microscope optique. Vos recherches profitent de la localisation spécifique des protéines marquées et des structures cellulaires dans la résolution ultrastructurale inégalée du microscope électronique.

Le didacticiel commence par une image de la séquence tripeptidique des acides aminés du chromophore EGFP avant maturation (Thr65-Tyr66-Gly67) étiré en une configuration linéaire de sorte que le résidu de thréonine est positionné dans la partie supérieure gauche de la fenêtre. Les atomes d'oxygène sont colorés en rouge, les atomes d'azote en bleu, les atomes de carbone en blanc et les traits noirs aux extrémités peptidiques indiquent la continuation de la chaîne principale au-delà de la partie illustrée. Pour utiliser le didacticiel, utilisez le curseur Chromophore Maturation Control pour transiter à travers la réorganisation intramoléculaire auto-catalysée de la séquence tripeptide qui se produit au cours de la maturation du chromophore.

Didacticiel : Formation d'un chromophore EGFPDidacticiel : Formation d'un chromophore EGFP
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